CF游离DNA提取磁珠-游离微量DNA提取磁珠
一、简介游离 DNA(cfDNA)提取磁珠是一种专为富集、纯化体液中微量短片段游离 DNA 而优化的超顺磁性纳米微球,是当前液体活检、无创产前检测(NIPT)等
一、简介
游离 DNA(cfDNA)提取磁珠是一种专为富集、纯化体液中微量短片段游离 DNA 而优化的超顺磁性纳米微球,是当前液体活检、无创产前检测(NIPT)等领域的核心耗材。其核心优势在于高效捕获短片段 DNA、易自动化、高纯度、无有毒试剂。
二、核心工作原理(盐溶洗脱 / 固相可逆吸附)
基于高盐吸附、低盐洗脱的硅基核酸纯化原理:
结合(高盐低 pH)
在含异硫氰酸胍、氯化钠等的高浓度盐溶液(pH 5-6)中,盐离子破坏 DNA 表面水化层,中和 DNA 磷酸骨架负电荷,使其与磁珠表面硅羟基形成氢键与疏水作用,特异性吸附。
磁分离
外加磁场,结合 cfDNA 的磁珠快速聚集管壁,吸弃上清(去除蛋白质、脂质、盐等杂质)。
洗涤
加入乙醇洗涤液,洗去残留杂质,磁分离弃废液。
洗脱(低盐高 pH)
加入低盐缓冲液(如 TE,pH 8.0),破坏 DNA 与磁珠的结合力,释放高纯度 cfDNA。
三、cfDNA 专用磁珠的关键特性
短片段富集:优化表面修饰,优先结合 < 300 bp的 cfDNA 片段,减少基因组 DNA(gDNA)污染。
高磁响应:磁含量高,分离快(<30 秒),适合自动化高通量。
低非特异性吸附:表面亲水性好,蛋白 / 杂质残留少,下游 PCR / 测序抑制率低。
高悬浮性:分散性佳,不易团聚,保证结合充分、均一性好。
大体积适配:可处理0.5-5 mL血浆 / 血清,满足低浓度 cfDNA 富集。
四、主要优势(对比离心柱法)
特性 磁珠法(cfDNA 专用) 离心柱法
短片段回收率 高(>80%) 低(易流失)
处理通量 高通量 / 全自动 低 / 手动
样品体积 大体积(mL 级) 小体积(µL 级)
纯度 / 抑制物 纯度高、抑制少 易残留乙醇 / 盐
操作 简单、无离心 多次离心、繁琐
成本(批量) 低 高
五、典型应用场景
液体活检(癌症早筛 / 监测):血浆循环肿瘤 DNA(ctDNA)提取。
无创产前检测(NIPT):母血中胎儿游离 DNA(cffDNA)。
移植排斥监测:供体来源游离 DNA(dd-cfDNA)。
感染 / 慢病检测:病毒 / 病原体游离 DNA。
尿液 / 脑脊液 cfDNA:泌尿系统疾病、中枢神经系统疾病研究。
六、主流产品代表
赛默飞 Dynabeads MyOne Silane:短片段捕获强、稳定性佳。
默克 MagPrep® Silica:磁响应快、适合自动化。
国产硅羟基磁珠(强烈推荐):性能对标进口、成本更低。